Krok 37: Používat čistou vodu
Voda ve vodní lázni pro napínání řezů je pravidelně vyměňována.
Voda ve vodní lázni pro napínání řezů je pravidelně doplňována, ale vyměňována jen příležitostně. To může vést k její kontaminaci plísněmi apod., které pak mohou přilnout na řez nebo podložní sklo.
Krok 38: Zajistit čistotu podložních skel
Před použitím podložních skel je vždy třeba ověřit jejich čistotu. Manipulace s nimi by však měla být minimalizována, aby nedošlo k jejich kontaminaci kožními buňkami.
Čistota podložních skel není vůbec ověřována, což se může projevit na výsledku práce.
Krok 39: Zamezit křížové kontaminaci vzorků
Mezi krájením různých bloků je voda dobře vyčištěna od zbytků řezů z předchozího bloku.
Mezi krájením různých bloků není voda dobře vyčištěna od zbytků řezů z předchozího bloku a dochází ke křížové kontaminaci, která může vést ke zmatkům či dokonce i k nepřesné diagnóze.
Krok 40: Zamezit kontaminaci kožními buňkami
Aby nedošlo ke kontaminaci vzorků kožními buňkami, při práci je třeba se vyvarovat česání vlasů a mnutí rukou.
„Někteří laboranti kontaminují skla jejich kožními buňkami více než jiní. Zřejmě nevědí, jak se tomu dá zabránit.“
Krok 41: Nepracovat s více bločky současně
Při napínání nikdy nepracujeme s více bločky současně.
Při práci s řezy z více bloků současně hrozí nepřesná identifikace vzorků, zejména pokud jsou vzorky stejné.
Krok 42: Kontrolovat teplotu vody v lázni
Teplota vody v napínací lázni by měla mít o 5-10°C méně, než je bod tání parafínu. Řezy se díky tomu snadno vyrovnají a parafín ještě nebude tát.
Pokud napínání v lázni trvá déle než 15 sekund, hrozí roztavení vosku a s ním i poškození integrity tkáně.
Krok 43: Zamezit shrnutí řezů
Řezy se v napínací lázni snadno vyrovnají.
Nedochází k napnutí správně ukrojených řezů a řezy jsou shrnuté. Mírné zvýšení teploty vody v lázni by tento problém mohlo vyřešit.
Krok 44: Vyvarovat se nadměrné expanze řezů
Řezy jsou na vodní hladině v lázni ponechány jen do té doby, než dojde k jejich napnutí. Poté jsou ihned přeneseny na podložní sklo.
Z pohodlnosti jsou řezy v lázni ponechány delší dobu, což může způsobit jejich roztrhání a může vést k poškození tkáně, zejména jemných vzorků, např. lymfatické tkáně.
Krok 45: Při napínání řezy nepoškodit
Při napínání je dbána nejvyšší opatrnost, pokud je z řezu potřeba mechanicky odstranit shrnutí. Pomoct si lze štětečkem, pinzetou nebo háčkem.
Při narovnávání řezů na vodní hladině není brán zřetel na jemnost tkání a záhyby a shrnutí jsou odstraňovány nešetrně. Poškození může být makroskopické nebo jen mikroskopické.
Krok 46: Řezy pečlivě vybírat
První nebo druhý řez nejsou použity, protože vychlazený blok se průchodem čepele zahřívá a dochází k tepelné expanzi parafínu. Teprve po několikerém projetí žiletky přes blok se teploty vyrovnají a lze ukrojit kvalitní řez.
První nebo druhý řez jsou použity, protože vypadají nejlépe.
Krok 47: Zamezit vzniku bublin pod řezem
Bublinky, vznikající ve vodní lázni zahříváním vody musí být odstraněny před položením řezu na hladinu vodní lázně.
Bublinky jsou v lázni ignorovány a při položení řezu na hladinu se pod ním zachytí. Předpokládá se, že bubliny zmizí během sušení řezu na skle. Po vyschnutí řezu se v místech bublin řez roztrhá.
Krok 48: Zvýšit přilnavost řezů
Použitím kvalitních skel, např. nabitých nebo potahovaných skel.
Někdy mají řezy tendenci uplavat ze skla, zejména při vaření u imunohistochemických metod nebo histologických metod, vyžadujících zahřívání skel. Potom je třeba použít potahovaná skla.
