Krok 64: Vědět, co chceme vidět
Je třeba znát dobře metody speciálního barvení a vědět, co nám které barvení přinese a které struktury budou znázorněny.
„Jen následujeme protokol a nevíme, jaký výsledek barvení bude mít.“
Krok 65: Používat pozitivní kontrolu
Vždy používat kontrolní řez, o kterém víme, že obsahuje tkáňovou strukturu, kterou se snažíme prokázat.
„Pokud struktura tkáně, kterou hledáme, není po barvení vidět, předpokládáme, že ve vzorku není přítomna.“
Krok 66: Dodržovat časy barvení
Dodržovat časy barvení v jednotlivých lázních.
Časy inkubací jsou pouze přibližné, což vede k nekonzistentním výsledkům
Krok 67: Kontrolovat stabilitu barvících roztoků
Zatímco některé barvící roztoky se časem příliš nemění, jiné je třeba připravovat těsně před použitím. Výjimkou nejsou ani takové roztoky, které musí nejprve oxidovat (dozrát) a teprve poté mohou být použity.
Předpokládáme, že všechny roztoky mají téměř neomezenou životnost.
Krok 68: Správně skladovat barvící roztoky
Roztoky je třeba správně skladovat. Některé potřebují chlad, protože jsou náchylné k plesnivění nebo jsou citlivé na světlo a je nutno je skladovat ve tmě.
„Všechny naše barvící roztoky jsou uloženy na poličce nad barvícím stolem. Někdy vidíme v našich řezech zvláštní struktury plné mikroorganizmů „
Krok 69: Přesně dodržovat protokol barvení
Přesné dodržování protokolu barvení.
Laboranti občas dosahují rozdílných výsledků, i když údajně používají týž protokol.
Krok 70: Zaznamenávat všechny změny
Vždy je třeba si zaznamenávat výstup z metod, které ten den byly použity.
Pokud nejsou výstupy zaznamenány, je obtížné hledat řešení, když nejsou výsledky optimální a záznamy o změnách protokolu chybí.
Krok 71: Standardizovat promývací kroky
Promývání by mělo být standardizované, aby se zabránilo variabilitě výsledků barvení.
Různí laboranti promývají různě. Někteří řezy propírají jemně, jiní silně třesou kyvetou, což má různý vliv na výsledek.
Krok 72: Pečlivě nastavit mikroskop
V klíčových krocích barvení používáme mikroskop. Při pozorování nezakrytých (vlhkých) řezů je však nutno dbát na jeho řádné nastavení, jinak bychom mohli docílit falešně pozitivních výsledků.
Úroveň barvení je vždy posuzována pouhým okem.
